Densitometridata genereret for Western blots er almindeligt brugt til at sammenligne proteinoverflod mellem prøver. … Ikke-lineære densitometridata blev observeret, når Western blots blev påvist ved brug af infrarød fluorescens eller kemiluminescens og under forskellige SDS-PAGE-betingelser.
Hvad er densitometrianalyse?
Densitometry er den kvantitative måling af optisk tæthed i lysfølsomme materialer, såsom fotografisk papir eller fotografisk film, på grund af eksponering for lys.
Hvordan bruger du densitometri i Image J?
Densitometri ved hjælp af ImageJ
- Klik på midten af firkanten, og træk den henover til næste bane. …
- For den sidste bane, gentag proceduren, men tryk på Ctrl og 3 for at indstille den sidste bane. …
- Brug linjeværktøjet til at tegne linjerne for at fjerne banebaggrunden fra beregningerne. …
- Gå til: Analyse→Gels→Label Peaks for at få rapporten.
Hvordan analyserer du Western blot-resultater?
Valider dine kvantificeringsværktøjer . Kør for eksempel en blot, hvor banerne er fyldt med 20 µg, 15 µg og 10 µg tot alt protein. Efter analyse bør den relative kvantificering af målbåndene være 2, 1,5 og 1. Prøv forskellige kvantificeringsværktøjer og indstillinger, indtil du pålideligt kan gengive de korrekte resultater.
Hvordan kvantificerer man en western-klat?
Trin 1: Bestem baggrunden-fratrukkettætheder af dit protein af interesse (PI) og den normaliserende kontrol (NC). Trin 2: Identificer den NC, der har den højeste tæthedsværdi. Trin 3: Divider alle NC-værdierne med den højeste NC-densitetsværdi for at få en relativ NC-værdi.
