Indlæsning af kontrolantistoffer er vigtige kontroller, da de angiver ens belastning af prøver på tværs af alle brønde. Indlæsningskontroller indikerer også den korrekte overførsel af proteiner til membranen under western blotting-processen. Indlæsningskontroller er typisk proteiner med høj og allestedsnærværende ekspression.
Hvad gør en indlæsningskontrol?
En ladningskontrol er et protein, der bruges som kontrol i et Western blotting-eksperiment. … De bruges til at sikre, at proteinet er blevet fyldt ligeligt på tværs af alle brønde.
Hvorfor bruger vi en indlæsningskontrol i Western blot?
Loading kontroller har en anden rolle som kontrol i western blots. De kan bruges til at kontrollere, at der har været en jævn overførsel fra gelen til membranen over hele gelen. Dette er bydende nødvendigt, når der foretages sammenligninger af proteinekspressionsniveauerne mellem prøver.
Hvordan bruger du indlæsningskontrollen i Western blot?
Signalerne fra indlæsningskontroller bruges typisk til at normalisere signalerne fra proteinerne af interesse. For at bruge en ladningskontrol til disse formål skal påvisning med kontrolproteinantistof og det eksperimentelle antistof udføres på samme blot. En række forskellige proteiner bruges som indlæsningskontroller.
Hvorfor bruges actin som en indlæsningskontrol?
Beta-actin, bruges norm alt som en indlæsningskontrol for Western Blot tilnormaliser niveauerne af detekteret protein ved at bekræfte, at proteinbelastningen er den samme på tværs af gelen.
