I de seneste år brugte Coriell alt varmeinaktiveret serum til sine cellekulturer for at inaktivere komplementproteinet, der findes i nyfødt kalveserum. Da vi har skiftet til føt alt bovint serum, finder vi ud af, at varmeinaktivering er ikke nødvendigt for de fleste cellelinjer.
Hvor længe varmer du inaktivere FBS?
Følgende protokol er foreslået til varmeinaktivering af føt alt bovint serum (FBS). FBS opvarmes til 56± 2°C i 30± 2 minutter i omrørende vandbad. Heat Inactivation (HI) – en proces, hvorved FBS holdes ved en temperatur på 56± 2° i 30± 2 minutter.
Hvorfor er varmeinaktivering nødvendig for FBS før brug?
En almindelig behandling af FBS er varmeinaktivering, hvor FBS opvarmes til 56°C i 30 minutter i et vandbad med lejlighedsvis rystning. Formålet er at inaktivere de komponenter af komplementsystemet, der er til stede i FBS [24], og andre potentielle ukendte hæmmere af cellevækst.
Hvorfor skal du opvarme inaktiveret serum?
Målet med varmeinaktivering er at ødelægge komplementaktiviteten i serumet uden at påvirke produktets vækstfremmende egenskaber. Fjernelse af komplementaktivitet fra serummet er ikke påkrævet for de fleste cellekulturer, men kan være nødvendig for kulturer, der er følsomme over for komplementaktiviteten.
Hvordan opbevarer du varmeinaktiveret FBS?
Beskyt optøet FBS og andre sera med sikker nedkøling ogopbevaring. Brug optøet serum omgående. Flydende FBS og andet serum kan opbevares på køl (2 til 8 °C) op til fire uger.
